与传统的从生物体的核酸(基因组DNA或mRNA)钓取方法相比,人工合成全基因有以下优点:(1)合成周期短,还可以保证序列100%正确无误;(2)可以对密码子进行优化,以提高基因的表达效率;由于每个物种偏爱的编码子不同,当异源蛋白在 E.coli 里表达时,有些蛋白很难得到高表达。如果将真核生物偏爱的密码子改为原核生物偏爱的密码子,就可以实现真核生物的基因的高效表达;(3)当只知道某一蛋白或多肽的氨基酸序列而不知其核苷酸序列时,也可以通过人工合成基因的方法进行克隆和表达。(4)可根据需要进行基因的定点突变以改造基因。(5)研究人员根据自己的意愿设计得到自然界中很难获得甚至不存在的基因。
1. 当客户提供DNA或者氨基酸序列或者基因ID号时,我们将根据客户的要求对提供的序列进行分析,为客户提供免费基因设计服务,最终序列经客户确认后作为基因合成的基本信息。根据最终序列的具体情况设计合成方案,通过业务员或技术员给客户作出报价。
2. 与客户达成一致意见后,签订基因合成服务协议和保密合同,客户交纳相应预付款。预付款到账即为基因合成开始期限,我们将立即进行单链 Oligo 合成、 DNA片段拼接等工作,然后把全长基因克隆于载体中,再通过DNA测序确认合成基因的正确性。
3. 测序结果如果发现有错误位点,我们会采取相应的技术手段进行修复校对,保证整个序列的正确性。
4. 提供实验结果:包括测序彩色峰图、含有目的基因的重组质粒及含该质粒的甘油菌等。
上海吉玛全基因合成交货期限及收费标准:
| 基因全长(bp) |
交货期限(工作日) |
价格(¥) |
| ≤300 |
7-12 |
1000元 |
| 300-3,000 |
12-40 |
3.5元/bp |
| ≥3,000 |
每增加1Kb增加14个工作日 |
协商 |
| 特殊序列 |
协商 |
协商 |
克隆用的标准载体图谱:
注意事项:
1、我公司用于基因合成的标准载体为pUC57,如需克隆到指定的载体中,则该载体应由您提供,我公司将以最优惠的价格帮您完成,每次亚克隆需增加五个工作日,并在结算时按克隆难易程度收取500-1000元的亚克隆费用。我们提供的甘油菌一般为Top10菌株。
2、若需要提供密码子优化服务,请注明需要优化,并提供给如下讯息: 1需要合成的蛋白序列或DNA序列;2宿主表达系统;3两端的限制性酶切位点,优化后的序列中需要避免的限制性酶切位点;4优化后的序列中需要保留的限制性酶切位点。
3、服务协议签订之后,您不得随意更改基因序列;在基因合成的过程中,我公司会在每周五的时候向您报告基因合成的进展情况。
4、为您提供的产品和技术资料包括:1不少于4ug的含目的基因的重组质粒一份;2含上述重组质粒的甘油菌一份;3基因序列100%正确的原始测序报告电子版一份和序列比对文件;4基因合成报告单一份等。
5、 我公司承诺:对客户的基因序列不做任何形式的扩散、开发或利用,对相关信息实行完全保密,公司提交产品一个月后,即彻底销毁所有相关的引物、质粒和菌种。
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