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RNA数字表达谱高通量测序
利用高通量测序技术测定样本中每个转录本3’端一段特定的标签序列来定量相应转录本的表达水平以及比较样本之间基因表达差异。因采用通用接头，可以样本快速进行测序，
利用高通量测序技术测定样本中每个转录本3’端一段特定的标签序列来定量相应转录本的表达水平以及比较样本之间基因表达差异。因采用通用接头，可以样本快速进行测序，检测某一物种特定状态下的基因表达情况。构建数字基因表达谱（Digital Gene Expression Profile)。利用新一代高通量测序技术和高性能的计算分析技术，能够全面地检测某一物种特定组织在特定状态下的基因表达情况，可以应用于肿瘤基因药物筛选，分子育种、药物研发及基础研究等领域。
数字基因表达谱测序服务流程：
1.样品RNA准备
2.测序文库构建
(1)使用oligo dT微珠纯化mRNA
(2)cDNA反转录反应合成合成第一链链cDNA
(3)合成第二链DNA
(4)用限制性内切酶DpnII或NlaII消化cDNAI.
(5)连接特定接头至5’端
(4)使用标签酶MmeI消化获得21bp标签序列
(5)连接特定接头至3’端
(6)高保真聚合酶富集构建成功的测序文库
(7)高通量测序
(8) 数据分析
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实验数据
使用方法
应用实例
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样品要求
1) 浓度要求：提供样品浓度≥700 ng/μL、总量≥20μg 的总RNA 样品，或总量大于200ng的mRNA。
2) 纯度要求：OD值应在1.8至2.2之间。
3) 电泳检测28S:18S至少大于1.5。
4) 请提供样品具体浓度、体积、制备时间、溶剂名称及物种来源。
5) 运输
a) RNA 干粉：可室温下或干冰运输。
b) RNA溶于酒精：加1/10倍体积的3M NaOAc，pH5.2；2.5倍体积100%酒精，混匀后保存于-80℃，干冰运输。
c) RNA溶于去DEPC水：浓度要求在700ng/μL以上，保存于-80℃，液氮或干冰运输。
6) 其它要求
样品请置于1.5 mL管中，管上注明样品名称、浓度以及制备时间，管口用封口膜封口。在运输前将所有样品管固定于50 mL带盖离心管中，再将50 ml管放在封口袋中。使用冰袋或干冰运输，并且尽量选用较快的邮递方式，以降低运输过程中样 品降解的可能性。
样品请置于1.5 mL管中，管上注明样品名称、浓度以及制备时间，管口用封口膜封口。在运输前将所有样品管固定于50 mL带盖离心管中，再将50 ml管放在封口袋中。使用冰袋或干冰运输，并且尽量选用较快的邮递方式，以降低运输过程中样 品降解的可能性。
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（1）当日17：00前，免费修改或取消。
（2）当日17：00到次日17：00前，按该项产品金额的50%收取。
（3）次日17：00后，按该项产品金额的100%收取。