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ChIP-Seq 高通量测序服务
染色质免疫共沉淀测序(ChIP-Seq)
观察了特定条件下有哪些基因表达,自然想进一步了解是哪些转录因子参与这些被调节基因表达的调控。因此,我们需要一种方法,能够鉴定胞内特定转录因子真正结合的DNA序列。染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitian,Chip)正好能满足这一需求。
利用甲醛处理生长细胞、甲醛作为一种交联剂可以使紧密接近的蛋白质和DNA共价结合,再裂解细胞,利用超声将DNA切成500bp左右长度的片段,此过程中甲醛交联作用不会破坏,这样蛋白仍会结合其识别的DNA结合位点。利用抗此蛋白的特异抗体与蛋白相互作用,进而可以将与将蛋白交联的DNA片段与其他组分分离。抗原抗体复合物可以通过与抗体特异结合的磁珠(beads沉淀。将免疫沉淀物加热至65℃维持12~18h,破坏交联作用,进而DNA从复合物中释放。
技术路线及测序流程:
实验数据
使用方法
应用实例
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