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RNA pull down试剂盒
RNA pull down 是检测 RNA 结合蛋白与其靶 RNA 之间相互作用的主要实验方法之一。使用标记生物素的 RNA 探针与胞浆蛋白提取液孵育,形成 RNA - 蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过 WB 实验检测特定的 RNA 结合蛋白是否与 RNA 相互作用。若待检测目的蛋白明确,选择 WB 鉴定;若不明确,则可选择质谱鉴定。
产品特点
技术优势
案例展示
图 Positive RNA probe 探针特异性捕获 HuR 蛋白
注:泳道 1:Input;
泳道 2-3:裂解液与磁珠孵育后上清 Flow Through;
泳道 4-5:蛋白洗脱液 Eluate Buffer;
泳道 6-7:Eluate Buffer 洗脱蛋白后的磁珠继续用 Loading Buffer 洗脱;
产品目录
| 目录号 | 产品名称 | 规格 | 价格 | 交货日期 |
|
G20101 |
RNA pull down试剂盒-P1 |
12rxns |
¥3,998 |
10个工作日 |
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G20301 |
RNA pull down试剂盒-P3 |
12rxns |
¥4,998 |
10个工作日 |
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G20001 |
RNA pull down试剂盒(buffer) |
12rxns |
¥3,000 |
10个工作日 |
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A12014 |
RNA pulldown探针-P1(生物素修饰和LNA修饰) |
2OD |
¥998 |
5个工作日 |
|
A12027 |
RNA pull down 探针-P3(生物素修饰和LNA修饰) |
2OD |
¥1,998 |
5个工作日 |
|
A13001 |
RNA pull down探针阳性探针(生物素修饰和LNA修饰) |
2OD |
¥500 |
5个工作日 |
|
A13002 |
RNA pull down探针阴性探针(生物素修饰和LNA修饰) |
2OD |
¥500 |
5个工作日 |
|
A13003 |
RNA pull down探针阳性探针(生物素修饰和LNA修饰) |
1OD |
¥298 |
5个工作日 |
|
A13004 |
RNA pull down探针阴性探针(生物素修饰和LNA修饰) |
1OD |
¥298 |
5个工作日 |
试剂盒组成(12 tests)
| 编号 | 成分 | 容量 | 储存 |
|
1 |
RNA Capture Buffer |
10mL/tube |
4℃ |
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2 |
20mM Tris |
4mL/tube |
4℃ |
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3 |
10× Binding Buffer |
1mL/tube |
4℃ |
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4 |
Wash Buffer |
10mL/tube |
4℃ |
|
5 |
磁珠 |
300μL /tube |
4℃ |
|
6 |
裂解液 |
4mL /tube |
-20℃ |
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7 |
蛋白酶抑制剂 |
400μL/tube |
-20℃ |
|
8 |
RNA 酶抑制剂 |
400μL/tube |
-20℃ |
|
9 |
Eluate Buffer |
1mL/tube |
-20℃ |
|
10 |
Loading Bufer |
1mL/tube |
-20℃ |
|
11 |
阳性对照 - Positive RNA probe |
1 OD/tube |
-20℃ |
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12 |
阴性对照 - Negative RNA probe |
1 OD/tube |
-20℃ |
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13 |
HuR 一抗 |
5μL/tube |
-20℃ |
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14 |
DEPC 水 |
20mL/tube |
4℃ |
注:对照组与实验组消耗试剂量相同,一次 pull down 实验(含 Input 组、pull down 组及一个阴性或阳性对照组),至少要消耗 2 rxns 试剂量。
常见问题及处理方法
| 问题 | 原因 | 建议解决方案 |
|
RNA 探针降解 |
探针反复冻融、保存不当; 体外转录 / 标记时污染 RNase |
全程加RNase 抑制剂,冰上操作,探针分装 - 80℃保存,避免反复冻融 |
|
WB 检测结果异常, 无条带或条带不符 |
条带信号不足 |
增加或减少样本量(样本量过多,裂解不充分);增加抗体用量; 多次洗脱提高洗脱效率; |
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抗体质量较差 |
用裂解物预检抗体质量; |
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靶蛋白内源表达过低 |
增加样本量或采用基因过表达工具方法提高目的蛋白表达量 |
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非特异性结合蛋白条带过多 |
优化孵育时间、洗涤次数 、探针与裂解物 |
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蛋白降解 |
使用新鲜或冻存时间不长的样本 |
技术优势
• 高特异性:富集与特定RNA序列相互作用的蛋白质,具有高度的特异性
• 联合应用:可与其他技术相结合,如质谱分析、蛋白质组学方法和转录组学方法等,进一步深入研究RNA-蛋白质相互作用的功能和调控网络
服务流程
功能介绍与实验实例
使用方法
相关文献
本商品目录中的产品介绍按以下内容分类:
RNA 干扰研究工具
MicroRNA 研究工具
RNA 相互作用研究工具
产品价格
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