+400-6900-195
公司产品
gRNA敲除检测PCR试剂盒
吉玛基因gRNA敲除检测PCR试剂盒/引物套装是用于CRISPR-Cas9基因敲除实验的专业检测工具，为您提供快速、直观的基因编辑效果鉴定解决方案。
无标题文档
gRNA (guide RNA) 是CRISPR-Cas9基因敲除系统中的关键组成部分，它通过碱基互补配对与靶序列（DNA）精准结合，引导Cas9酶对基因组特定位置进行切割，从而实现基因编辑。
|
|
| CRISPR-Cas9基因敲除系统gRNA(guide RNA)工作原理示意图 | gRNA敲除检测原理示意图 |
本产品针对gRNA靶点位置设计引物，利用PCR扩增方法，对双gRNA敲除实验PCR产物或单gRNA经T7E1试剂盒处理后的PCR产物琼脂糖凝胶电泳片段大小的差异起到指示作用，进而有效检验gRNA敲除效果。同时提供了更便捷、优质的反应体系，具有特异性强、灵敏度高、扩增效率高等特点，为 CRISPR-Cas9基因敲除实验提供效果检测。
核心优势
- 靶点特异：针对您的gRNA序列设计引物，精准定位切割位点，每个试剂盒/引物套装只针对一个特定的gRNA靶点。
- 操作便捷：提供预先优化好的2X gRNA PCR Master Mix，简化反应体系配置，操作简单高效。
- 高灵敏度：对样本DNA需求量低，微量基因组DNA即可获得清晰、特异的扩增条带。
- 灵活选择：提供包含预混液的“试剂盒”和仅含引物的“引物套装”两种形式，满足不同实验阶段和预算的需求。
产品订购
|
目录号 |
产品名称 |
规格 |
价格 |
|
106001 |
gRNA敲除检测PCR试剂盒 |
50 rxns |
¥750 |
|
106002 |
gRNA敲除检测PCR试剂盒 |
100 rxns |
¥1,200 |
|
106003 |
gRNA敲除检测PCR引物套装 |
1 nmol |
¥200 |
注：本产品需根据客户提供的gRNA靶点序列进行定制化引物设计。
产品组成
1. gRNA敲除检测PCR试剂盒 (货号: 106001, 106002)
|
试剂盒组分 |
50 rxns |
100 rxns |
|
2X gRNA PCR Master Mix |
500 μl |
1 ml |
|
Primer set (10 μM) |
20 μl |
40 μl |
|
RNase free H₂O |
500 μl |
1 ml |
保存条件：-20℃保存，干冰运输。
2. gRNA敲除检测PCR引物套装 (货号: 106003)
|
引物套装组分 |
1 nmol |
|
Primer set |
干粉状 |
|
RNase free H₂O |
1.5 ml |
保存条件：常温保存和运输。
应用场景
- CRISPR-Cas9基因编辑效果初筛：快速验证gRNA是否成功引导Cas9在基因组目标位置产生切割。
- 基因编辑效率快速评估：通过电泳条带判断野生型、杂合子、纯合子基因型，初步评估敲除效率。
注意事项
- 本方法尤其适用于双gRNA介导的片段敲除（Deletion）检测，可通过PCR产物片段大小的显著变化直接判断。
- 对于单sgRNA Cas9造成的基因突变（通常为20bp以内的小片段缺失或插入），直接进行PCR扩增无法有效区分片段大小的微小差异。建议搭配使用吉玛基因T7E1突变检测试剂盒（货号: 104006） 对PCR产物进行酶切处理，从而有效检测突变效率。
实验案例
双gRNA CRISPR-Cas9基因编辑实验的检测结果示意图：
注：WT:野生型(未发生敲除)；Heterozygote:杂合子(部分敲除)；Homozygote:纯合子(完全敲除)
使用方法
- 样本制备：提取待测细胞或组织的基因组DNA。
- PCR体系配置（以20μl反应体系为例）：
- 2X gRNA PCR Master Mix: 10 μl
- Primer set (10 μM): 0.4 μl
- Genomic DNA: 1-10 ng (通常加2 μl)
- RNase free H₂O: 补足至20 μl
- PCR反应程序（推荐）：
- 预变性：95℃, 3 min
- 扩增循环（40 cycles）：95℃, 12 sec → 62℃, 40 sec
- 最终延伸：72℃, 5 min（可选）
- 结果检测：取PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，在紫外凝胶成像系统下观察并分析条带。
相关产品
- T7E1突变检测试剂盒 (货号: 104006)：用于检测单sgRNA造成的小片段基因突变。
- gRNA/Cas9载体构建系列 (货号: 101001-101020)：包括单/双gRNA载体、Cas9载体、慢病毒及腺相关病毒包装服务。
- CRISPR-Cas9基因编辑试剂盒 (货号: 105001-105006)：提供RNP或mRNA形式的完整基因编辑解决方案。
常见问题（Q & A）
- Q: 这个试剂盒可以检测任何基因的敲除吗？
A: 可以。您只需提供目标基因的gRNA靶点序列，我们会针对该靶点设计特异性的检测引物。
- Q: 检测单sgRNA的编辑一定要用T7E1试剂盒吗？
A: 是的。由于单sgRNA造成的突变通常很小（<20bp），直接通过琼脂糖凝胶电泳难以分辨。T7E1酶能识别并切割含有错配（突变形成）的DNA异源双链，从而通过条带变化检测突变，是更灵敏的方法。
- Q: 试剂盒和引物套装我该怎么选？
A: 如果您是首次使用或希望流程最简化，推荐购买包含预混Master Mix的试剂盒。如果您已自有优化好的PCR预混液，仅需定制引物，则可选择引物套装。
更多相关产品及详细信息，请咨询我司技术支持。
技术支持与订购
全国免费热线：400-690-0195
官网：www.genepharma.com
上海电话：021-51320195
苏州电话：0512-86668828
功能介绍与实验实例
使用方法
相关文献
订购须知
下单前请务必核对订购表客户信息和订购内容无误，订单一经确认，当天即启动生产。 超过当日17：00后不能修改或者取消，如果需要取消订单，由此产生的费用，将由客户承担。
【取消订单费用规则】
（1）当日17：00前，免费修改或取消。
（2）当日17：00到次日17：00前，按该项产品金额的50%收取。
（3）次日17：00后，按该项产品金额的100%收取。